NEFA Assay Kit alat je za kvantifikaciju NEFA

Komplet NEFA testa je alat za kvantifikaciju NEFA (dušikov oksid). Koristi se za određivanje koncentracije NEFA u uzorcima krvi ili tkiva. NEFA je vitalni nutrijent koji je odgovoran za regulaciju energetskog metabolizma, srčane ekscitabilnosti, neuromuskularne provodljivosti, krvnog tlaka i zgrušavanja krvi. Uglavnom se nalazi u kostima, mišićima, mekim tkivima i crvenim krvnim stanicama.

Priprema

NEFA je mali protein od 50,2 kDa koji ima sposobnost vezanja na DNK. To je kompleks citosolne sintaze masnih kiselina tipa I (FAS) koji proizvodi neesterificiranu palmitinsku kiselinu. U prisutnosti acil-CoA oksidaze (ACS), FAS kompleks oksidira 3-metil-N-etil-N-(b-hidroksietil)-anilin u 4-aminoantipirin, koji je molekularni prekursor za acetil-CoA. Ovaj proces je ključni enzimski proces za sve eukariotske organizme.

Iako NEFA možda nema veliku masu masnog tkiva, ona je važan izvor goriva za periferna tkiva. Metabolizira ga jetra i transportira u kompleksu s albuminom do perifernih tkiva. NEFA također oslobađa tioesterazna (TE) domena kompleksa FAS.

Pipetiranje

ELISA setovi se koriste za otkrivanje malih kemijskih spojeva, proteina i peptida. Ovi se kompleti temelje na rekombinantnim proteinima eksprimiranim u E.coli. Kompleti ne sadrže azid, timerosal i druge prirodne resurse.

U kompletu se nalaze reagensi kao što su BSA, pufer za razrjeđivanje bez pirogena i otopina za pranje. Otopina za ispiranje stabilna je dva tjedna na 2-8°C. Pufer za razrjeđivanje sadrži 0,9% fiziološke otopine.

Komplet ima interni NEFA standard. Tome se dodaje NEFA u koncentraciji koja odgovara očekivanoj koncentraciji u uzorku. Mjeri se apsorbancija plavo-ljubičastog pigmenta na 546 nm kako bi se izračunala koncentracija NEFA u uzorku.

kolorimetrijski

Korištenje WAKO NEFA kompleta izazvalo je niz rezultata, uključujući i neke koji su besmisleni. Unatoč tome, NEFA kit je dostojan konkurent kada je u pitanju određivanje relativnog sadržaja masnih kiselina u uzorcima životinjskog tkiva. Kao takav, NEFA kit jedan je od popularnijih laboratorijskih testova. Komplet dolazi s uputama za testiranje različitih vrsta uzoraka, uključujući krv, serum, slinu i razne lipide.

Najuzbudljiviji dio kompleta je to što se može koristiti za mjerenje raznih masnih kiselina, uključujući one koje se obično nalaze u lipidima. Komplet dolazi s nizom enzima dizajniranih za otkrivanje raznih masnih kiselina, uključujući C-8 i C-16 masne kiseline koje se nalaze u ljudima i životinjama. Unatoč tome, pribor se ne preporučuje za upotrebu u visoko preciznim koncentracijama FFA u širokom rasponu.

Elektrokemijski

NEFA su važne masne kiseline za ljudsko zdravlje, ali se rijetko procjenjuju. Osim toga, njihova je detekcija vrlo skupa. Stoga praćenje promjena u njihovim koncentracijama može pomoći u točnijoj prevenciji i upravljanju bolestima. U ovoj studiji razvijen je komplet za elektrokemijsku analizu NEFA, koristeći PDA-MWCNT kao površinu senzora. Ova je elektroda pokazala dobru elektrokatalitičku aktivnost za korake NEFA oksidacije i mogla se koristiti u stvarnim aplikacijama.

Enzimska elektroda sastojala se od višeslojnog kompozitnog filma PDA-MWCNT i ACOD, ACS i polimera. Redoslijed slojeva odabran je tako da odgovara redoslijedu enzimske reakcije. Utvrđeno je da su ACS i ACOD ostali biološki aktivni u filmu.

Koncentracija NEFA u T2D

Koncentracije NEFA u krvi proučavane su u kontekstu pretilosti i hipertenzije. Pokazalo se da ovi spojevi potiču povišenje krvnog tlaka putem a1-adrenergičke stimulacije i povećavaju oksidativni stres. NEFA su također povezane s metaboličkim sindromom. Ovi spojevi mogu biti važni u razvoju hipertenzije.

Predloženo je nekoliko modela za opisivanje odgovora NEFA u plazmi na intravenski izazov glukozom. Bostonski model točno je prikazao četvrtu fazu povećanja koncentracije NEFA. Međutim, model nije opisao početnu fazu latencije. Fabijanski model koristio je jednostavan eksponencijalni nagib za opisivanje ove faze. Slično tome, Thomasethov model nije mogao opisati fazu povrata.

Razine NEFA u trigliceridima

Nekoliko je studija istraživalo učinke barijatrijske kirurgije na sastav NEFA u plazmi. U meta-analizi objavljenoj 2016., razine NEFA u serumu smanjene su 6 i 12 mjeseci nakon operacije. To je moglo biti posljedica smanjene razine inzulina. U drugoj studiji, NEFA u plazmi izmjerene su u skupini pretilih pacijenata prije i nakon Roux-en-Y operacije želučane premosnice.

Koncentracije sedam NEFA smanjene su 9 mjeseci nakon operacije. Linoleat (omega-6 masna kiselina) smanjen je za 18:2, stearat za 18:0, a oleat za 16:0. Međutim, koncentracija dokozaheksaenoata nije bila promijenjena. NEFA su pretvorene u metilne estere masnih kiselina (FAME). Oni su zatim analizirani plinskom kromatografijom-masenom spektrometrijom (GC-MS).