ADA princip kompleta za analizu adenozin deaminaze (metoda glutamat dehidrogenaze)

U području suvremene medicinske dijagnostike mjerenje biokemijskih pokazatelja igra vitalnu ulogu u dijagnostici, liječenju i procjeni prognoze bolesti. Među njima, adenozin deaminaza (ADA), kao važan enzimski marker ima nezamjenjivu ulogu u dijagnostici raznih bolesti. ADA se obično mjeri posebnim priborom. Ovdje detaljno predstavljamo princip ADA kompleta za analizu adenozin deaminaze koji se temelji na metodi glutamat dehidrogenaze.

1. Fiziološki značaj ADA
ADA je enzim široko prisutan u različitim tkivima ljudskog tijela, posebno u limfocitima. Uglavnom je uključen u metabolički proces adenozina, pretvarajući adenozin u inozin i amonijak. U normalnim fiziološkim uvjetima, aktivnost ADA ostaje na relativno stabilnoj razini. Međutim, kada se određene bolesti pojave u ljudskom tijelu, aktivnost ADA će se promijeniti. Na primjer, kod bolesti kao što su tuberkulozni pleuritis, hepatitis i ciroza, aktivnost ADA će se značajno povećati.

2. Princip kompleta za određivanje ADA
Načelo kompleta za testiranje ADA (metoda dehidrogenaze glutaminske kiseline) temelji se na tome da ADA katalizira deaminaciju adenozina za stvaranje inozina i amonijaka, a zatim koristi glutamat dehidrogenazu za pretvaranje amonijaka u glutamat, istovremeno proizvodeći NADH. NADH ima karakterističnu apsorbanciju na valnoj duljini od 340 nm. Mjerenjem promjene apsorbancije može se neizravno izračunati aktivnost ADA.
Naime, kit sadrži reakcijski supstrat adenozin, koenzim NADH, glutamat dehidrogenazu i druge potrebne reagense. Tijekom reakcije ADA katalizira deaminaciju adenozina da bi se stvorio amonijak, koji reagira s α-ketoglutaratom pod djelovanjem glutamat dehidrogenaze da bi se stvorio glutamat, dok troši NADH. Mjerenjem promjene apsorbancije NADH prije i poslije reakcije može se izračunati aktivnost ADA.

Komplet za određivanje ADA (metoda dehidrogenaze glutaminske kiseline) osjetljiva je, točna i praktična metoda određivanja ADA. Temelji se na principu da ADA katalizira deaminaciju adenozina za stvaranje amonijaka i izračunava aktivnost ADA mjerenjem promjene apsorbancije NADH. Ovaj komplet ima široke izglede za primjenu u kliničkoj medicini i od velike je važnosti za poboljšanje dijagnostičke točnosti bolesti, usmjeravanje liječenja i procjenu prognoze.