Komplet za analizu adenozin deaminaze visoke kvalitete

Adenozin deaminaza (ADA) je prirodni enzim koji je uključen u imunološki odgovor. Funkcija adenozin difosfata (ADP) je aktiviranje stanica i provođenje membranske permeabilizacije te citotoksični učinak. Adenozin je identificiran kao jedna od najvažnijih aminokiselina potrebnih za normalnu aktivnost ljudskog mozga. Sintetizira ga jetra i distribuira se u krvnoj plazmi djelovanjem imunološkog sustava. Adenozin difosfat je nositelj antivirusnog genetskog materijala. U Biomedical Expou, ADA Activity Assay Kit koristit će se u kombinaciji s prethodno spomenutim BioVision Cytokine.

Adenozin difosfat (ADP) je nositelj faktora rasta T-limfocita. U BioVision Cytokine, adenozin deaminaza (ADO) se ekstrahira iz diseciranog bubrega i analizira pomoću komercijalno dostupnog spektrofotometrijskog automatiziranog testa. Reagens je prethodno tretiran s anti-fosfo-dglukozom (PI) kako bi se spriječila njegova reakcija s analitom.

Sastav komercijalno dostupnog AIDA Activity Assay Kita uključuje dvije glavne komponente - reagens i laboratorijsku opremu. Reagensi sadržani u Aida Activity Assay Kitu uključuju pročišćeni koktel enzima (Sigma-FCA). Laboratorijska oprema sastoji se od skenera mikropločica (postavljenog iza staklenog mikroskopskog stakalca), staklenog posuđa, knjige rezultata standardne krivulje i boce za ispiranje. Prije uporabe, uzorke Aida Activity Assay Kita potrebno je oprati dekloriranom vodom. Korištenje reagensa i laboratorijske opreme nije ograničeno samo na laboratorijske testove.

Kako bi se ispitala sposobnost Aida Activity Assay Kit za mjerenje ukupne aktivnosti adenozin deaminaze, provedeno je nekoliko eksperimentalnih sesija. Prva sesija sastojala se od četiri dana ručnog praćenja. Stotinu i pedeset mikrolitara Aida-GFP-a otopljeno je u vodi iz slavine i pomiješano s fosfatno puferiranom otopinom soli. Nakon dvadeset minuta, uzorci su testirani na HPLC ekranu za ravnotežu mase.

Druga sesija uključivala je dva dodatna dana ručnog praćenja. Uzorci su ubrizgavani na kasetu s krivuljom dva sata kako je gore opisano. Treća sesija uključivala je tri dodatna dana ručnog praćenja u istoj prostoriji, nakon čega su uslijedila četiri sata supkutanih injekcija adenozin deaminaze (ADCA). Uzorak krvi je uzet nakon jednog sata za analizu.

Za testiranje sline, pet stotina mikrolitara standardne otopine deaminaze i pH porasla je pomiješano u nesterilnoj posudi. Svinje su smjele piti čitav niz tekućina, od obične vode do dijetalnih gaziranih pića, po želji. Kada su standardne otopine dosegle točku vrenja, umetnuta je kapaljka s unaprijed određenim volumenom sline i izmjerena je aktivnost adenozin deaminaze.

Posljednja skupina od šest uzoraka analizirana je pomoću komercijalno dostupnog kompleta za analizu fosforimidazoleamina na bazi sline (Saproflavil; Thermo Instruments). U ovom nizu testova, jedna kap fosforimidazolamin/sline ada reagensa je pomiješana s volumenom vode iz slavine i osušeni prah je dodan u uzorke. Nakon trideset minuta uzet je drugi uzorak istog uzorka. U ovom slučaju, aktivnost u slini je izmjerena odmah. Komplet je posebno dizajniran za mjerenje aktivnosti kiseline u ljudskoj slini. Kao što se očekivalo, postojala je značajna količina aktivnosti koja se mogla otkriti.

Kao što se očekivalo, oba su analizatora dala slične rezultate. Vrlo specifična priroda analize salivarno-pozitronske emisijske tomografije (SPECT), zajedno s visoko osjetljivom metodologijom (visoka detekcija intraoralne tekućine) rezultirala je dosljedno visokom preciznošću i značajnim mjerenjima. Laboratorijsko osoblje korišteno za postupke bili su stručnjaci za to područje. Nije bilo dokaza o kontaminaciji ili bilo kakvoj pogrešci u eksperimentu. Ispitanici su dali informirani pristanak, a postupak je slijedio preporuke koje je postavila Američka udruga kliničkih endokrinologa. Sveukupno, rezultati dobiveni s kompletom za analizu adenozin deaminaze pokazali su dobru ponovljivost, što je potvrđeno odvojenim studijama neovisnih kliničkih laboratorija.